薛海波‘ 卢承德，李肃， 徐希坤‘;(1.青海大学医学院2.青海大学附属医院)
摘 要 目的探讨血清抵抗素(resistin),肿 瘤坏死因子一a( TNF-a)水平与2型糖尿病(T2DM)患者血管内皮功能紊乱的关系。方法刚定60例T2DM患者及20例健康人(正常对照组)血清中抵抗素、TNF一。、血管性血友病因子(vWF),C反应蛋白(CRP)及一氧-化氮(NO)的水平，分别将以上检测结果进行比较。结果T2DM组血清抵抗素、TNF- a ,VW F,C RP水平均高于正常对照组(P< 0.01 或P<0.05)，而NO低于正常对照组(P< 0.01 );其中抵杭素与TNF一a,vWF,CRP呈正相关(r分别为0.47,0.32 ,0.42，均P< 0.05 );T NF一a与vWF,CR P亦呈正相关(r=0.30, P<0.05; r=0.42,P<0.01);抵抗素、TNF - a与NO呈负相关(r分别为一0.47, -0.34,均P<0.01);多元线性回归分析显示血清NO,vWF,CRP分别与抵抗素或TNF一a存在显著的相关性(均P<0.05)。结抢血清抵抗素、TNF-a水平可能与T2DM患者血管内皮功能紊乱有关，是预刚T2DM血管并发症有价值的指标。
关键词 抵杭素肿瘤坏死因子一a 2型糖尿病血管内皮细胞中
脂肪组织为一种具有旺盛内分泌功能的器官，已经成为学术界的共识，抵抗素、TNF一a作为脂肪
因子与T2DM的关系日益受到关注，近期研究显示，其可能参与了T2DM血管并发症发生发展川。本研
究通过测定血清抵抗素、TNF一a水平，探讨其与T2 DM患者血管内皮功能紊乱的关系及其可能在
T2 DM血管并发症中所起的作用。
1 资料与方法
1.1 研究对象
选择 T2 D M患者60例(男性32例，女性28例)，为青海大学附属医院内分泌科自2006年9月至2006年12月门诊及住院患者(均符合1999年WHO糖尿病诊断标准)，平均年龄51. 12士巧.35岁。同时从健康体检者中选取20名志愿者作为正常对照组(男性11例，女性9例)，平均年龄50.20
土13.20岁。所有人选者均排除急、慢性感染病史。
1.2 方法
1.2.1 一般资料:所有受试者晨起空腹(禁食8h以上)，测定身高(BH)、体重(BM)、腰围(WC)、血
压(BP)，计算体重指数(BMI)。 行口服75g葡萄糖耐量实验(OGTT )，采空腹静脉血，一部分用于测定空腹血糖(FBG),C肤(C一P)、胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbAlc)及血生化;一部分分离血清，冰箱(一7090)保存，用于测定抵抗素、TNF一。,NO,vWF及CRP,
1.2.2 检测方法:血糖采用葡萄糖氧化酶法测定;HbA,。采用比色法测定;C肤、胰岛素采用放射免疫
分析法测定;血生化用全自动生化分析仪测定;抵抗素(美国AssayPro公司),TNF一。、VWF,C RP采用酶联免疫吸附法测定，NO采用硝酸还原酶法(上海船夫生物科技公司提供)测定。胰岛素抵抗指数
(HOMA一IR) =FBGx F INS/22.5 。
1.3 统计学方法
计量 资 料 以x士S表示，正态分布资料(部分非正态资料作对数转换以符合正态分布)两组间比较
用t或t检验;非正态资料进行非参数检验;抵抗素、TNF一。与各实验指标间的相关性用Spearman秩相关分析;NO,vWF及CRP作对数转换后行多元线性回归分析。所有统计学分析均用SPSS11.5统计软
件完成。
2 结果
2.1 T2DM组与正常对照组比较T2 DM 组 患者血清抵抗素、TNF一a水平均高于正常对照组(P<0.01)。血管内皮功能指标vWF,CRP均高于正常对照组(P<0.05);NO低于正常对照组(P< 0.01 )，见表1。
2.2 T 2D M 患者血清抵抗素与相关指标的相关性Spe arm an 秩相关分析显示，血清抵抗素水平与
TNF一a,WC,BMI,FBG,HbAIc,HOMA一IR呈正相关。与血管内皮功能指标vWF,CR P亦呈正相关;
而与NO呈负相关，见表2a
2.3 T2D M患者血清TNF一a与相关指标性行Spearman相关分析，血清TNF一。水平与血管内皮功能指标vWF,C RP及FBG,H bAlc, B MI,MA一IR呈正相关;与NO呈负相关，见表3
2.4 多元线性回归分析
分别 将 I g(NO),Ig(vWF),Ig(CRP)作为应变量，resistin,T NF一a,W C、BMI,H bAlc ,F BG,H OMA- IR作为自变量，进行多元线性回归分析。结果显示，回归方程分别为1g(N O)= 2.565一0.38 8x re -sistin(P=0.005)一0.29 9x W C(P=0.027)、Ig(vWF)=1.467+0. 299 x resistin(P=0.025)+0.3Y 4x B MI(P=0.004)、Ig(CRP)=一0.510+0.34 6 xT NF一。(P二0.001)+0.56 3x B MI(P=0.000)。
3 讨论
内皮功能紊乱是糖尿病血管并发症的始动和关键环节，甚至在糖调节受损(IGT)或空腹血糖受损(IFG)的患者就已存在血管内皮功能的异常，而内皮功能的异常也加速了糖尿病及其并发症的进程。
血管内皮是重要的内分泌器官和效应器官。vWF是血管内皮细胞和巨核细胞合成的一种糖蛋白，当血管内皮细胞受损时，贮存于Weibel一Palade小体内的vWF释放人血液，介导血小板勃附，进而聚集于受损的血管内皮下，启动血栓形成。循环血液中vWF主要来自血管内皮细胞，其水平反映了血管内皮损伤的程度，血中vWF升高被认为是血管内皮细胞损伤的标志[21。血管内皮细胞合成的NO具有扩血管和抑制血小板聚集的功能，当血管内皮损伤或受到某些细胞因子刺激后，NO合成和分泌或生物利用度下降，使内皮依赖性舒张作用明显受损，其后果是血管收缩、弹性下降，最终导致血管结构和功能改变〔31. CRP是参与炎症或急性时相反应的主要蛋白，能直接作用于血管内皮，促进糖化及脂化，终末产物改变致血管壁增厚，弹性下降，促进动脉硬化的发展，其增高反映内皮功能出现紊乱[’]。本研究中通过测定血清NO,VWF,CRP等指标来评估血管内皮功能，与NC组相比，结果发现T2DM组患者血清vWF,CRP含量明显升高，NO含量降低，并且在经生化、心电图、X线、彩超、眼科等检查排除血管并发症的部分患者中已出现以上指标的异常，这表明T2DM患者在出现血管并发症之前就已存在血管内皮功能的紊乱，随着内皮功能障碍的进展，最终导致血管并发症的发生。
抵抗素是2001年美国科学家Steppan等〔’〕在筛查唾哇烷二酮类(thiazolidinediones, TZ Ds)药物下调的基因时发现的一种由脂肪细胞分泌的新的激素，因具有抑制脂肪生成及促进内皮细胞活化等功能其与糖尿病血管病变的关系日益受到重视。新近研究显示，抵抗素能诱导人大动脉的平滑肌细胞发生增殖，从而导致动脉粥样硬化，与内皮依赖性血管舒张功能之间存在负相关[6]。本研究的结果显示，T2DM患者血清抵抗素水平明显高于NC组;相关分析显示，T2DM患者血清抵抗素水平与vWF,CRP呈正相关，而与NO呈负相关。多元回归分析结果显示，抵抗素进入了lg(NO)及lg(vWF)的回归方程，说明抵抗素是影响NO,VWF的重要因素。以上研究结果与Verma等[’〕的报道一致，表明抵抗素水平与T2DM患者血管内皮功能紊乱有关，可能参与了血管并发症的发生发展。内皮功能受损常与胰岛素抵抗合并存在，两者相互协同，共同促进血管病变的形成。大量研究显示，随着血糖的升高，血管内皮功能受损逐渐加重，高血糖、胰岛素抵抗、氧化应激及慢性炎症等多种因素相互影响，使血管病变的病理改变不断恶化，最终导致血管事件的发生。在本研究中同时发现，T2DM患者血清抵抗素水平与WC,BMI,FBG,H bAlc, H OMA一IR均呈正相关，这与Chanchay等[‘]临床研究结果一致。并且BMI或WC分别进人vWF,CRP,NO多元回归分析的回归模型，与血管内皮功能指标呈明显正相关。因为BMI或WC为量化肥胖(尤其是腹型肥胖)的重要指标，而肥胖(尤其是腹型肥胖)与胰岛素抵抗的关系已经成为共识。本研究结果亦显示抵抗素水平与WC,BMI及HOMA一IR均呈显著正相关，进而说明其可能为联系肥胖(尤其腹型肥胖)与胰岛素抵抗的重要因素。胰岛素抵抗是导致T2DM的重要的原因，因此，抵抗素可能在T2DM的整个发展过程中起着重要的作用。
TN F一a是一种由脂肪细胞和巨噬细胞分泌的细胞因子，血管内皮细胞表面存在TNF一a受体，为TNF一a作用的靶细胞之一。以往研究发现，TNF -a作为一种炎症因子可直接损伤血管内皮细胞。新近研究表明，在胰岛素抵抗患者的脂肪组织中存在着TNF一。的过度表达，脂肪源性TNF一。被认为与T2DM的发生关系密切[9]。本研究显示，T2DM患者血清TNF一。明显高于NC组，并且与vWF,CRP,HOMA一IR呈明显正相关，与NO呈负相关，提示TNF一。可能是联系T2DM患者胰岛素抵抗与血管内皮细胞功能紊乱的重要因素。俞璐等〔‘。」的研究发现，血清抵抗素水平与可溶性TNF受体(sTNF一R2)呈正相关，而sTNF一R2是反映TNF一a系统激活的指标。与以上研究一致，本研究结果显示T2DM患者血清抵抗素与TNF一。水平呈明显正相关;并且TNF一a进人lg (CRP )多元回归分析的回归模型，说明TNF一a为影响CRP水平的重要因素，进一步提示抵抗素、TNF一a可能相互促进，共同导致血管内皮的损伤。
总之 ， T2 DM患者血管内皮细胞功能紊乱的发病机制尚未完全清楚，可能是多种因素共同作用的结果。本研究显示，血清抵抗素、TNF一a在T2DM患者明显升高，并且与血管内皮功能指标间存在相关关系，表明其可能与T2DM患者血管内皮功能紊乱有关，在T2DM血管并发症的发生中发挥重要作用。因此，血清抵抗素及TNF一。是早期预测T2D M血管并发症的有价值的指标。
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